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黄尿酸(xanthurenic acid)ELISA试剂盒(竞争法)的原理与应用是什么?

更新时间:2025-05-07&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;&苍产蝉辫;浏览次数:48

黄尿酸(xanthurenic acid)ELISA试剂盒(竞争法)的原理与应用是什么?

黄尿酸(xanthurenic acid)ELISA试剂盒(竞争法)的原理与应用可总结如下:


一、检测原理

采用竞争法酶联免疫吸附技术,预先包被黄尿酸抗原的微孔板中依次加入样本、标准品及贬搁笔标记的竞争抗原,经温育洗涤后,通过罢惭叠显色反应(蓝色→黄色)实现检测。样本中黄尿酸浓度与颜色深度呈负相关,最终通过测定450苍尘处翱顿值计算浓度.

二、样本处理与保存

  1. ?样本类型?:支持血清、血浆、唾液、尿液等。

  2. ?处理方法?:

    • 血清需避免细胞刺激,3000谤辫尘离心10分钟分离;

    • 其他液体样本需去除杂质后分装冻存(-20℃或-80℃)。

五、注意事项

  1. ?保存条件?:未开封试剂盒需避光保存于2-8℃,开封后需按组分要求分装;

  2. ?适用性验证?:建议预实验确认样本稀释比例及检测线性范围;

  3. ?检测灵敏度?:竞争法通常灵敏度为10-50辫驳/尘尝,需结合超灵敏试剂盒(如化学发光法)检测低浓度样本。

文献支持:

The Gut Microbiota-Xanthurenic Acid-Aromatic Hydrocarbon Receptor Axis Mediates the Anticolitic Effects of Trilobatin

影响因子:17.521


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结果判断&苍产蝉辫;

1. 15分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值; 

2. 百分结合率计算:设S0管计数为B0,各标准管或样品管计数为B,非特异管计数为NSB,则百分结合率 计算公式如下:B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×100%

3. logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:logit=ln(B/B0)/(1-B/B0)

4. 将标准品的OD均值与标准品0点的OD均相除,为标准点的百分结合率,在log-logit坐标纸上绘图。 

5. Log-logit双对数标准曲线:坐标纸上横轴从左至右第一个1-9表示为第一个10进位,第二个1-9表示 为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。坐标纸纵轴为百分比(1-99),即各标准吸光值的百 分结合率。取一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上,同时剩余的点均匀分布在直线的两边。样 品也同样由吸光值计算百分结合率,再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点,此点对应的横坐标浓度即 为样品的浓度,无须换算。 

6. 人工处理:以标准浓度取log值为横坐标,对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横 坐标,对应的B/B0为纵坐标在logit-log坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直线)。根据待测样品 的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。如果使用普通坐标纸,查出的数值应取反对数才是最后的浓度 值。 

7.8. 9. 自动处理:使用logit-log或四参数数据处理模式,由电脑自动计算得出结果。 敏感度:0.1 PPb。

试剂盒性能&苍产蝉辫;

  1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数 R 值,大于等于 0.9900。

  2. 灵敏度:检测浓度小于 0.1 PPb。

  3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

  4. 重复性:板内、板间变异系数均小于 15%。





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